僅供科研實驗、不得用于臨床
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
鄰苯二甲醛試劑
100ml
FS-R7739
分類:生化檢測 儲存條件:4℃,避光,12個月 用途:用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細胞、組織等樣本中的膽固醇含量定量測定。 注意事項:鄰苯二甲醛試劑屬于膽固醇檢測(鄰苯二甲醛比色法)的核心成分,檢測原理是膽固醇及其脂,在強酸存在下與鄰苯二甲醛反應,產(chǎn)生紫紅色化合物,該化合物在550nm波長處有*吸收峰,分光光度計在550nm處進行比色測定,膽固醇含量在4mg/ml之內(nèi)與吸光度呈良好線性關系。 標準溶液配制: 1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。 2 。在校正前,準備ORP標準溶液。 3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
注意事項: ①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。 ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。 ③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 ④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。 ⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。 ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。 ⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。 ⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。 ⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。 使用方法: 1. 常用篩選濃度 注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,使用濃度為50-1000μg/mL。對于*次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定*篩選濃度。 一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。 2. 殺滅曲線的建立 注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。 1) *天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)*;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。 2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。 3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。 4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。 5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。 3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選 1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。 注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,*將細胞稀釋至豐度不過25% 2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。 3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。 4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。 5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。 小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]右旋酮洛芬氨丁三醇質量規(guī)格:>98.5%,BR(S)-Ketoprofen tromol
BPIFA2 Others Human 人 BPIFA2 / C20orf70 人細胞裂解液 (陽性對照) 右旋酮洛芬氨丁三醇(標準品)質量規(guī)格:含量測定(S)-Ketoprofen tromol
人食管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL植物凝膠(Sigma)質量規(guī)格:進分;SigmaP8169Phytagel
7WML6.0細胞,人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株 生孢梭菌 狗肺成纖維樣細胞;DogL1右旋酮洛芬質量規(guī)格:>98.5%(S)-(+)-Ketoprofen
PPBP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標簽)甲氨蝶呤-甲基-d3質量規(guī)格:美國進口Methotrexate-methyl-d3 倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3PROTEINASEK,20MG/MLSOLUTION蛋白酶K,20mg/ml溶液生物技術級5MLCOLD
JF-305細胞,人胰腺癌細胞 人皮膚癌細胞系,HS-1細胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質母細胞瘤瘤株;G422本達 Bqntczonq 2027-89-0
HuH-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2Cytidine胞嘧啶核苷7.5KUBR,98%
Promocell C-22011 Endothelial Cell GrowthMedium 2, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基2型(即用) 500mlKANAMYCIN50MG/ML卡那霉素溶液級20MLFrozen
人肺動脈成纖維細胞裂解物HPAFL(二甲基價酰按) 鄰苯二甲醛試劑HEPG2.2.15 肝癌細胞HBV病毒株草酰乙酸Oxaloacetic acid質量規(guī)格:>97%,BR
CL-0290MDA-MB-468(人癌細胞)5×106cells/瓶×2硫酸鋅七水(AR)Zinc sulfate, heptahydrate質量規(guī)格:>99.5%,AR
RLF, 大鼠成纖維細胞1酸鉀鈉四水Potassium tatrate, tetrahydrate質量規(guī)格:>98%,BR
雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL縮二脲Biuret質量規(guī)格:>98%,BR
人脊髓星形膠質細胞RNAHA-sp NA硫酸鎂無水(分子生物學級)Magnesium sulfate anhydrous質量規(guī)格:>99%,分子生物學級
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僅供科研實驗、不得用于臨床
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
鄰苯二甲醛試劑
100ml
FS-R7739
分類:生化檢測
儲存條件:4℃,避光,12個月
用途:用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細胞、組織等樣本中的膽固醇含量定量測定。
注意事項:鄰苯二甲醛試劑屬于膽固醇檢測(鄰苯二甲醛比色法)的核心成分,檢測原理是膽固醇及其脂,在強酸存在下與鄰苯二甲醛反應,產(chǎn)生紫紅色化合物,該化合物在550nm波長處有*吸收峰,分光光度計在550nm處進行比色測定,膽固醇含量在4mg/ml之內(nèi)與吸光度呈良好線性關系。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
注意事項:mol
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,使用濃度為50-1000μg/mL。對于*次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定*篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) *天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)*;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,*將細胞稀釋至豐度不過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]右旋酮洛芬氨丁三醇質量規(guī)格:>98.5%,BR(S)-Ketoprofen tro
BPIFA2 Others Human 人 BPIFA2 / C20orf70 人細胞裂解液 (陽性對照) 右旋酮洛芬氨丁三醇(標準品)質量規(guī)格:含量測定(S)-Ketoprofen tromol
人食管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL植物凝膠(Sigma)質量規(guī)格:進分;SigmaP8169Phytagel
7WML6.0細胞,人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株 生孢梭菌 狗肺成纖維樣細胞;DogL1右旋酮洛芬質量規(guī)格:>98.5%(S)-(+)-Ketoprofen
PPBP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標簽)甲氨蝶呤-甲基-d3質量規(guī)格:美國進口Methotrexate-methyl-d3
倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3PROTEINASEK,20MG/MLSOLUTION蛋白酶K,20mg/ml溶液生物技術級5MLCOLD
JF-305細胞,人胰腺癌細胞 人皮膚癌細胞系,HS-1細胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質母細胞瘤瘤株;G422本達 Bqntczonq 2027-89-0
HuH-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2Cytidine胞嘧啶核苷7.5KUBR,98%
Promocell C-22011 Endothelial Cell GrowthMedium 2, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基2型(即用) 500mlKANAMYCIN50MG/ML卡那霉素溶液級20MLFrozen
人肺動脈成纖維細胞裂解物HPAFL(二甲基價酰按)
鄰苯二甲醛試劑HEPG2.2.15 肝癌細胞HBV病毒株草酰乙酸Oxaloacetic acid質量規(guī)格:>97%,BR
CL-0290MDA-MB-468(人癌細胞)5×106cells/瓶×2硫酸鋅七水(AR)Zinc sulfate, heptahydrate質量規(guī)格:>99.5%,AR
RLF, 大鼠成纖維細胞1酸鉀鈉四水Potassium tatrate, tetrahydrate質量規(guī)格:>98%,BR
雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL縮二脲Biuret質量規(guī)格:>98%,BR
人脊髓星形膠質細胞RNAHA-sp NA硫酸鎂無水(分子生物學級)Magnesium sulfate anhydrous質量規(guī)格:>99%,分子生物學級