ELISA夾心法原理與步驟

來源：上海博湖生物科技有限公司 >> 進入該公司展臺 2022/07/05 14:54:13 已瀏覽：次

導(dǎo)讀:ELISA夾心法原理與步驟

原理：針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結(jié)合物。夾心法常用于檢測大分子抗原，一般的操作步驟為:

1. 將具有專一性的抗體固著（coating）于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體；

2. 加入待測檢體，檢體中若含有待測的抗原，則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結(jié)；

3. 洗去多余待測檢體，加入另一種對抗原專一的一次抗體，與待測抗原進行鍵結(jié)；

4. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結(jié)；

5. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。

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